The purpose with this project was to develop a method to evaluate the toxicity of environmental chemicals against plants using plant cell culture. Plant cell cultures were treated with soil extracts from a soil contaminated with high levels of polycyclic aromatic hydrocarbons, PAH. The toxicity of the extracts was tested using a cell viability test. Cell cultures were stained with Evan’s Blue which stains dead cells blue. The colour can then be released from the cells and the optical density determined spectrophotometrically. As a complement to the plant cell test the toxicity of environmental chemicals against plant growth was also tested. As the preparation of plant cell suspension cultures was very time-consuming the method could only be properly done once and only with few replicates with small volumes. Preliminary results indicate that the soil extracts do not effect the viability of the cells. However to draw any further conlusions if the method can be used to evaluate the toxicity of environmental chemicals for plant cells more large scale tests are needed using a more toxic substance than PAH as a soil extract to get better reliability on the results.
Syftet med detta D-projekt var att ta fram en metod för att utvärdera miljögifters toxicitet mot växter genom att använda växtcellkulturer. Växtcellkulturer behandlades med jordextrakt från en förorenad jord med höga halter av polycykliska aromatiska kolväten, PAH. Extraktens toxicitet utvärderades genom att testa överlevnadsförmågan. Cellkulturerna färgades med Evans Blue som färgar döda celler blåa. Genom att den infärgade färgen sedan extraheras ut från cellerna kan den optiska densiteten mätas spektrofotometriskt. Som komplement till cellkulturstestet utvärderades miljögifters toxicitet mot växter även genom groningstest. Då det tog lång tid att odla fram cellkulturerna kunde den framtagna metoden endast testas en gång och då med få replikat och små volymer. De preliminära resultaten indikerar att jordextrakten inte påverkar växtcellernas överlevnadsförmåga. För att kunna dra några klara slutsatser om metoden kan användas för att utvärdera miljögifter toxicitet för växtceller behöver fler storskaliga tester utföras med ett mer toxiskt ämne än PAH-jordextrakt för att få större säkerhet i resultaten.