Change search
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Undersökning av tillväxtregulatorn tidiazuron vid transformering av äpple, Malus pumila Mill
2005 (Swedish)Independent thesis Advanced level (degree of Master (One Year))Student thesis
Abstract [sv]

Syftet med arbetet var att undersöka effekten av tillväxtregulatorn tidiazuron, ett syntetiskt cytokinin, på transformeringsfrekvensen hos äpple, Malus pumila Mill. Tidiazuron tillsattes i koncentrationerna 5,10 och 15 µM i kallusinduktionsmediet. Transformeringen utfördes med hjälp av bakterien Agrobacterium tumefaciens stam C58C1. Bakterieplasmiden innehöll bl a generna gus och nptII. gus-genen är en s k markörgen och nptII-genen en selektörsgen. nptII-genen kodar för ett enzym som inaktiverar antibiotikumet kanamycin, vilket gör att otransformerade skott dör då de odlas på medium som innehåller kanamycin. Trots 8-10 veckors tid på regenereringsmedium (RM-medium) bildades inga skott. Effekten av de olika koncentrationerna tidiazuron på transformeringsfrekvensen kunde därför ej avgöras. Detektion av transformerade skott skulle ha utförts med hjälp av PCR-teknik. Då enbart kallus bildades gjordes försök att genomföra PCR-reaktioner med växtprover av kallusvävnad. Två kallusprover av varje variation av tidiazuron testades med PCR-teknik. Av dessa visade sig tre innehålla gus- och nptII-fragmenten, vilket visar på att transformeringen i dessa fall lyckats. Möjliga orsaker till avsaknad av skottproduktion kan vara att plantorna ej varit helt friska, då bladen vid infektering blivit rödpigmenterade och hårda, samt att koncentrationerna av tidiazuron varit för höga för att gynna skottproduktion. The aim of this experiment was to study the effect of the growth factor thidiazuron, a synthetic cytokinin, on the transformation frequency of apple, Malus pumila Mill. Thidiazuron of the concentration 5,10 and 15 µM were added to the callus induction medium. The transformation was carried out with support from the microbe Agrobacterium tumefaciens C58C1. The microbe contained among other genes gus och nptII. The gus-gene is a so called marker gene and the nptII-gene a selective gene. The nptII-gene codes for an enzym inactivating the antibiotic kanamycin. Untransformed tissue dies when they are growing on medium which are containing canamycin. Despite 8-10 weeks of growing on regenerating medium (RM-medium) no shoot formation occured. The effect of the different concentration TDZ on the transformation frequency could therefore not be determinded. Detection of transformed tissues should have been carried out with the help of PCR-teknology. When only callus occurred tests were done with PCR-reactions on plant samples of callus tissue. Two calluspreparation of each variation of tidiazuron where tested with PCR-teknology . Three of these turned out to contain the gus- and nptII-fragmency which shows that the transformation succeeded in these cases. A possible cause for the loss of shoot formation could have been that the plants weren´t entirely helthy, as the leaves had gotten all red pigmented and hard and that the concentration of tidiazuron has been too high to favoure the shoot formation.

Place, publisher, year, edition, pages
2005. , 26 p.
Identifiers
URN: urn:nbn:se:kau:diva-52571Local ID: KEM-23OAI: oai:DiVA.org:kau-52571DiVA: diva2:1101098
Subject / course
Chemistry
Available from: 2017-05-29 Created: 2017-05-29

Open Access in DiVA

No full text

Search outside of DiVA

GoogleGoogle Scholar

CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf