Roscovitine och olomoucine är purinanaloger som selektivt inhiberar cyklin beroende kinaser genom att binda till ATP s bindnings säte. Båda ämnena anses vara potentiella antineoplastiska ämnen. Busulfan är en alkylerande agent som kliniskt används preparativt inför stamcells transplantationer och för behandling av leukemi. I den här studien utvecklades analytiska metoder för bestämning av dessa anti-cancer ämnen i biologiska vätskor. Micro extraction in packed syringe användes för on-line extraktion och vätskekromatografi kopplat med tandem masspektrometri (LC-MS/MS) användes för att analysera proverna. Den kvalitativa detektionsgränsen för roscovitine och olomoucine var 0.5 ng/mL, medan lägsta kvantitativa detektionsgränsen för roscovitine och olomoucine var 1.0 ng/mL respektive 5.0 ng/mL för busulfan. För kontrollproverna var avvikelsen från förväntat värde (riktighet) ±15%, ±6% och ±8%, medan precisionen var <=11%, <=10% och <=10% (R.S.D.) för roscovitine, olomoucine respektive busulfan. Kalibreringskurvorna för roscovitine och olomoucine var inom intervallet 0.5-2000 ng/mL och för busulfan 5-2500 ng/mL. Regression korrelations koefficienten var >=0.998 för alla individuella körningar. Bindningen av roscovitine till plasmaproteiner undersöktes vid tre olika koncentrationer med hjälp av jämviktsdialys och ultrafiltrering. LC-MS/MS användes för kvantifiering av obundet roscovitine. Stabiliteten av roscovitine i plasma undersöktes vid 4°C, 25°C och 37°C under 48 timmar och likaså effekten av upprepad frysning och tining. Roscovitine uppvisade hög bindning till plasma proteiner (?90%). Bindningen till humant serum albumin var vid konstant nivå vid koncentrationerna 100, 500 och 1500 ng/mL, medan bindningen till _1-acid glycoprotein minskade vid den högsta koncentrationen. Bindningsfrekvensen var högre vid 25°C jämfört med 37°C. Roscovitine var stabil i plasma under 48 timmar vid olika koncentrationer och temperaturer med en avvikelse på högst 10% (R.S.D.). pKa värdet för roscovitine bestämdes till 4.4 genom att använda kapillärelektrofores kopplat med masspektrometri. Alla metoder för kvantitativa analyser som presenteras i studien har god riktighet, precision, robusthet samt kort extraktions tid, vilket gör dem lämpliga för farmakokinetiska och farmakodynamiska studier. Resultaten rörande proteinbindning, pKa och stabilitet är viktiga inför kliniska prövningar för att utveckla roscovitine som en ny anti-cancer medicin.