Konjugerade fleromättade fettsyror med tre dubbelbindningar (CTFA) finns i växtmembran och fröoljor. De bygger upp cellens och organellernas membran och reglerar olika funktioner, t.ex. membraners permeabilitet. CTFAs är giftiga för animaliska tumörceller, mekanismen för detta är dock inte känd. För vidare studier krävs analysmetoder för CTFAs. HPLC och GC används vanligtvis för analys av fettsyror men dessa metoder innefattar ofta en derivatisering av fettsyrorna till metylestrar. I detta arbete beskrivs en metod för att separera CTFA isomerer med micellär elektrokinetisk kromatografi (MEKC). De variabler som har störst påverkan på separationen, koncentrationen av SDS och organisk modifierare, optimerades med en ”central composite circumscribed” (CCC) design. En SDS buffert innehållande acetonitril som organisk modifierare, 40 mM borat (pH 9.2) och 4 M urea gav ingen baslinjeseparation. Olika tillsatser testades för att försöka förbättra separationen. En buffert med två cyklodextriner, en laddad (heptakis-(6-sulfo)-b-cyklodextrin) och en oladdad (b-cyklodextrin), krävdes för en fullständig separation av CTFA isomererna. Separationseffektiviteten var 2.9 ¥ 105 teoretiska bottnar/m. Olika parametrars inverkan på separationen undersöktes också. Direkt UV-detektion vid 268 nm användes.

Conjugated trienoic fatty acids (CTFAs) are found in plant seed oils and membranes. They build up cell and organelle membranes and regulate various functions, e.g. permeability of membranes. CTFAs have been found have a cytotoxic effect on animal tumor cells, but the mechanism for this is not yet known. For further studies of CTFAs analysis methods are required. Fatty acid isomers are commonly analysed with HPLC and GC, but these methods generally involve derivatization of fatty acids to fatty acid methyl esters.In this work a method for separating CTFA isomers by micellar electrokinetic chromatography (MEKC) is described. The variables with largest influence on separation, SDS and organic modifier content, were optimized by a central composite circumscribed (CCC) design. A SDS buffer containing acetonitrile as organic modifier, 40 mM borate (pH 9.2) and 4 M urea did not give baseline separation. Different additives were tested in order to improve the separation. A dual CD system, with one charged (heptakis-(6-sulfo)-b-cyclodextrin) and one uncharged b-cyclodextrin (b-cyclodextrin), was necessary to obtain complete separation of CTFA isomers. Separation efficiency was 2.9 105 theoretical plates/m. The influence of different parameters was investigated. Detection was made by direct UV at 268 nm.