Change search
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Measurement of DNA adducts by 32P-Postlabelling - a comparision between TLC and HPLC
2001 (English)Independent thesis Advanced level (degree of Master (One Year))Student thesis
Abstract [sv]

De flesta kemiska ämnen som bedöms vara carcinogena i dag reagerar med DNA. Därför kan DNA addukter, d.v.s. molekyler kovalent bundna till DNA, användas som ett snabbt test vid bedömning av carcinogeniciteten hos enskilda ämnen eller blandningar. En välkänd teknik för att analysera DNA addukter är den så kallade 32P-postlabelling tekniken som består av fyra steg: 1) enzymatisk hydrolys av DNA 2) anrikning av addukt-nukleotider 3) inmärkning med den radioaktiva isotopen 32P 4) kromatografisk separation följt av detektion genom mätning av 32P-sönderfall. Den kromatografiska metoden som främst har använts är TLC, men den senare utvecklade HPLC-metoden har visat sig ha bättre upplösning. Vissa studier har indikerat att TLC-metoden är otillräcklig för att bestämma carcinogeniciteten hos olika petroleumprodukter. I den här studien analyserades DNA addukter som uppkommit av två oljor och av två olika polyaromatiska kolväten med de olika metoderna, TLC respektive HPLC, och resultaten jämfördes. Studien visade bland annat att några DNA addukter från en carcinogen olja vandrade väldigt kort från applikationspunkten i TLC-kromatogrammet. Studien visade också att några DNA addukter som uppkommit av ett polyaromatiskt kolväte (DMBA) inte var synliga alls i TLC-kromatogrammet. Dessa resultat stödjer hypotesen att TLC-metoden kan vara otillräcklig och att HPLC-metoden skulle kunna vara ett bättre alternativ vid bedömning av carcinogeniciteten hos oilka petroelumprodukter.

Abstract [en]

The majority of the chemical carcinogens identified today are DNA reactive. Therefore DNA adducts, i.e. molecules covalently bound to DNA, can be used as a fast screening test when assessing the carcinogenic potential of singel compounds or mixtures. A well-known technique for analysing DNA adducts is the 32P-postlabelling assay that comprises four steps: 1) enzymatic digestion of DNA 2) enrichment of the adducted nucleotides 3) labelling of the nucleotide-adducts with the radioactive isotop 32P and 4) chromatographic separation followed by detection by measuring 32P-decay. The chromatographic method most often used is TLC, but the more recently developed HPLC method has shown a better resolution. Some studies have indicated that TLC might be insufficient in the assessment of carcinogenic potential of different petroleum products. In this study, the ability of the TLC and the HPLC methods to detect DNA adducts, derived from two polycyclic aromatic compounds (PAC) and two oils, were compared. The study showed e.g. that some DNA adducts derived from a carcinogenic oil migrate very short from the application point in the TLC chromatogram and also that some DNA adducts formed by one PAC could not be seen at all in the TLC chromatogram. These results support the hypothesis that the TLC method migth be insufficient and that the HPLC method could be a better alternative when assessing the carcinogenic potential of petroleum products.

Place, publisher, year, edition, pages
2001. , 20 p.
Identifiers
URN: urn:nbn:se:kau:diva-52456Local ID: KEM-13OAI: oai:DiVA.org:kau-52456DiVA: diva2:1100982
Subject / course
Chemistry
Available from: 2017-05-29 Created: 2017-05-29

Open Access in DiVA

No full text

Search outside of DiVA

GoogleGoogle Scholar

CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf