Tidigare studier har visat att i tillägg till syre bildas väteperoxid vid belysning av tylakoidmembran. Målsättningen med detta arbete har varit att ta reda på var väteperoxiden bildas. Väteperoxid kan åtminstonde bildas på tre ställen i tylakoidmembranen: * Reduktion av syrgas på acceptorsidan av fotosystem I * Reduktion av syrgas på acceptorsidan av fotosystem II * Oxidation av vatten i det vattenspjälkande centrat hos fotosystem II Till mätningarna har både ljus och mörkerodlade tylakoidpreparationer från Chlamydomonas reinhardtii använts. Preparationerna har kontrollerats med avseende på syrgasproduktion och elektrontransport. Väteperoxid mätningarna utfördes med spektrofotometriska metoder vid ljusmättnad (270 mE/ m2/ sek.). Väteperoxidutveckling mättes dels på obehandlade preparationer och dels på preparationer med tillsatser vars syfte var att inhibera elektrontransport på olika ställen i PS II. Vid en tillsats av DCMU inhiberas elektrontransporten mellan QA och QB, detta leder till en minskning av väteperoxiden i både ljusodlat respektive mörkerodlat material, dock är minskningen högre i de mörkerodlade proverna. Att man ser en sådan skillnad skulle kunna bero på att avsaknaden av mangan kluster i de mörkerodlade proverna medför någon form av konformationsförändring av fotosystem II. Denna strukturella förändring skulle kunna möjliggöra en lättare åtkomst för DCMU, och därigenom en effektivare inhibering. Tillsatser av DPC som donerar elektroner till TyrZ leder även det till en minskad produktion av väteperoxid. För det ljusodlade materialet skulle detta kunna ses som om att vattenspjälkning behövs för väteperoxidproduktion. I det mörkerodlade materialet som saknar vattenspjälkande förmåga är minskningen lika stor som i det ljusodlade materialet, detta medför att man kan ifrågasätta det vattenspjälkande centrat som källa till väteperoxid, men det går inte heller att utesluta den möjligheten.
Earlier studies have shown that illumination of thylakoidmembranes can produce hydrogen peroxide in addition to oxygen. The purpose of this work was to find out where the hydrogen peroxide is produced. In thylakoides hydrogen peroxide can form in at least three places: * Reduction of oxygen on the acceptor side of photosystem I * Reduction of oxygen on the acceptor side of photosystem II * Oxidation of water in the water oxidizing complex of photosystem II Thylakoid preparations from both light and dark grown cultures of Chlamydomonas reinhardtii were used for the measurements. The preparations were controlled regarding to oxygen production and electron transport. The hydrogen peroxide measurements were performed at saturating light (270 mE/ m2/ sec.). Hydrogen peroxide formation where measured in either untreated thylakoid preparations or in the presence of additives whose purpose were to inhibit the electron transport through photosystem II. When adding DCMU1 the electron transport between QA and QB is inhibited. This leads to a decrease in hydrogen peroxide formation in light grown as well as in dark grown material, however there is a larger decrease in the dark grown preparations. This could be due to structural changes because dark grown material lacks functional Mn-clusters. It is possible that these structural changes in some way make it easier for DCMU to find it’s site and thereby more efficient inhibit the electron transport. When DPC is added it donates electrons directly to TyrZ. Also this leads to a decrease in hydrogen peroxide formation. In light grown preparations this could be seen as water splitting is needed for hydrogen peroxide formation, but on the other hand the decrease in dark grown preparations, which totally lack the ability to oxidize water, is as big as it is in light grown preparations. This question the wateroxidizing center as a source of hydrogen peroxide production, but it’s not right to completely leave out that possibility.