Solid fas mikro extraktion (SPME) och kapillär gas kromatografi (GC) i kombination med två olika detektorer, kvävefosfor detektor (NPD) och mass-spektrometer (MS) skulle utvärderas som ett medel för bioanalys. Substanserna som användes i försöks sammansättningen var Ropivacaine och tre av dess metaboliter. Försöket skulle utföras i human plasma. Första steget var att bestämma GC parametrarna. Temperatur programmeringen för ugnen var, inledande temperatur på 80*C i 3min, sen en ökning på 25*C/min till en temperatur på 280*C har nåtts. Detektorns (NPD) temperatur var 300*C och injektor temperaturen var på 250*C. Sju olika kolumner, från den opolära CP-SIL-5CB till den hög polära BPX70, var testade med avseende på retentions faktorer och asymmetri faktorer. Bästa resultatet fick man för HP-35, en medium polär kolumn. Det andra steget var att se på SPME parametrarna. Carbowax/divinylbenzene, polyacrylate and polydimethylsiloxane fibrer testades. Största utbytet fick man av Carbowax/divinylbenzene fibre. Effekter av absorptions tid, pH, salt tillsättning och prov temperatur studerades. Absorptions tiden var bestämd till 25 min för att se till behovet av en snabb metod. Med pH 9 ökade utbytet jämfört med pH 3, antagligen för att analyten blir oladdad vid ett högt pH. Salt tillsättning ökade utbytet upp till det att lösningen blev mättad, detta på grund av den ökade jon styrkan. Bästa utbytet med olika prov temperaturer fick man vid 40*C. Ökad temperatur ger snabbare mass transport. Om temperaturen blir för hög överförs analyten från vätske till gas fas. Sista steget var att se på metoden med två olika detektorer. Kalibrerings kurvan var linjär för alla analyter både när man använde NPD och MS detektorer. För NPD, kalibrerings området var 0.032-16 mM för Ropivacaine och 0.10-15 mM för metaboliterna, medans för MS kalibrerings området var 0.005-13mM för både Ropivacaine och dess metaboliter. Precisionen, mätt som relativ standard deviation (RSD), var mindre än 18% och säkerheten var i området 98-105% för NPD och för MS var precisionen midre än 25% och säkerheten var i området 100-114%. För NPD var gränsen för detektion 30 nM (Ropivacaine) och 100 nM (metaboliterna), medans för MS den var 5 nM (Ropivacaine, metaboliter).

Solid Phase Micro Extraction (SPME) and capillary gas chromatography (GC) in combination with two different detectors, nitro-phosphorous detector (NPD) and mass-spectrophotometer (MS) were studied as a tool for bioanalysis. The substances used in the model compound were Ropivacaine and three of its metabolites. The model was to be done in human plasma. First step was to determine the GC parameters. The temperature program was, oven temperature of an initial hold of 3min at 80*C, then an increase of 25*C/min until a temperature of 280*C was reached. The detector (NPD) temperature was 300*C and the injector temperature was kept at 250*C. Seven different columns, from the non-polar CP-SIL-5CB to the highly polar BPX70, were tested due to the retention factor and the asymmetry factor. The best result was for the HP-35, an intermediate polar column. The second step was to look at the SPME parameters. Carbowax/divinylbenzene, polyacrylate and polydimethylsiloxane fibres were tested. The highest recovery was for the Carbowax/divinylbenzene fibre. Effects of absorption time, pH, salt addition and sample temperature were studied. Absorption time was determined to 25 min due to the demands of a fast method. With pH 9 the recovery increased compared to pH 3, maybe because the analytes not was being charged at high pH. Salt addition increased the recovery up to the solution became saturated, due to the increased ionic strength. The best recovery with different sample temperature was at 40*C. Increasing temperature get faster mass transport. Too high temperature can transfer analyte from liquid to gas phase. The last step was to look at the method with two different detectors. The calibration curves were linear for all analytes using booth NPD and MS detector. For NPD calibration range was 0.032-16 mM for Ropivacaine and 0.10-15 mM for the metabolites, while for MS the calibration range where 0.005-13mM for both Ropivacaine and its metabolites. The precision, measured as relative standard deviation (RSD), was less than 18% and accuracy was in the range 98-105% for NPD and for MS the precision was less than 25% and accuracy was in the range 100-114%. For NPD the limit of detection was 30 nM (Ropivacaine) and 100 nM (metabolites), while for MS its was 5 nM (Ropivacaine, metabolites).