Möjligheten att använda en metod baserad på HPLC-DAD för kvantitativ och kvalitativ analys av tvåkomponent-blandningar, har undersökts. Det har visat sig att denna metod, tillsammans med multivariat datautvärdering, kan användas för bestämning av halt och identitet av ett antal lokalanestetika och vissa vanliga föroreningar som förekommer i lösningar av dessa substanser. Metodens precision, repeterbarhet och prediktionsförmåga över tid har jämförts med motsvarande för scannande UV-Vis spektroskopi och HPLC med detektion vid en våglängd. Resultaten av denna metodjämförelse antyder att metoden, tillsammans med multivariat kalibrering, kan vara ett alternativ till dessa mer etablerade tekniker för haltbestämning. Metoden, som inte utnyttjar någon kromatografisk separation, har också testats för identitetsbestämning. Tvåkomponent-blandningar av substanserna lidokain, 2,6-xylidin, mepivakain och prilokain har använts för detta ändamål. I dessa blandningar hölls lidokainhalten konstant medan halten av den andra substansen minskades successivt. Beroende på de olika absorptiva egenskaperna hos de ingående substanserna, så varierade detektionsgränsen för den andra substansen kraftigt från fall till fall. Hur kromatografisk separation påverkar detektionsgränserna för den ena substansen i tvåkomponent-blandningar, har också undersökts. Två olika fall av delvis kromatografiskt separerade substanser (Rs = 0.7, Rs = 1.0) och ett fall med fullständig kromatografisk separation (Rs > 1.5) konstruerades. Resultaten visar att fullständig kromatografisk separation inte nödvändigtvis behöver ge lägre detektiongränser än fall helt utan kromatografisk separation. De spektrala skillnaderna mellan de ingående substanserna kan vara av lika stor betydelse som kromatografisk separation om man vill detektera låga halter av föroreningar i tvåkomponent-blandningar. En datautvärderingsmetod baserad på principalkomponent-analys (PCA) har föreslagits för renhetsanalys av delvis separerade kromatografiska toppar. Metoden, som bygger på att storleken på egenvärdet samt score- och loadingvektorerna för den andra principalkomponenten studeras, verkar kunna utgöra ett tänkbart alternativ till de inbyggda funktionerna för renhetsanalys som finns i den kromatografiska mjukvaran Chromeleon version 6.11
The usage of a method based on HPLC-DAD has been investigated for quantitative and qualitative analysis of binary mixtures. It was found that together with appropriate multivariate data evaluation methods, the method can be used for content and identity determination of various local anaesthetic- and related compounds. The method has been compared to scanning UV-Vis spectroscopy and HPLC with one-channel UV-detection in terms of precision, repeatability and predictive ability over time. The results of the comparison suggest that the method, together with multivariate calibration, may be used as an alternative to these established techniques for content determination. The method, utilizing no chromatographic separation at all, has also been tested for identity determination using different binary mixtures of the compounds lidocaine, 2,6-xylidine, mepivacaine and prilocaine. In the mixtures, the lidocaine concentration was held at a constant level, and the concentration of the second compound was successively lower. Depending on the different absorptive preferences of the integral compounds, the detection limit of the second compound was found to variate largely in the different mixtures. Further on, the impact of chromatographic separation on the detection limit of one compound in binary mixtures has been investigated. Two cases of low chromatographic separation (Rs= 0.7, Rs= 1.0) and one case of complete chromatographic separation (Rs > 1.5) have been set up. The results show that complete chromatographic separation does not necessarily provide a lower detection limit than no chromatographic separation. The spectral differences between the two integral compounds can be equally important as complete chromatographic separation in order to detect low amounts of impurities in binary mixtures. A data evaluation method based on principal component analysis (PCA) has been proposed for the matter of peak purity analysis in the case of partly separated chromatographic peaks. This method, where the size of the eigenvalue belonging to the second principal component is monitored together with the scores and loadings, was found to be a potential alternative to the built-in functions for peak purity analysis available in the chromatographic software Chromeleon v. 6.11.